1.應(yīng)用菌種:BI—B7原種。
2.生產(chǎn)種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)方法:
(1)外觀標(biāo)準(zhǔn):菌袋無(wú)破裂,袋內(nèi)全部長(zhǎng)滿菌絲,菌絲灰白~黃褐色,無(wú)雜菌表現(xiàn),無(wú)明顯積水,菌種袋壁緊貼,菌種柱上部無(wú)明顯干縮,培養(yǎng)后期出現(xiàn)多量黃褐色~黑褐色疣狀物(原基)。
(2)鏡檢:菌絲著色深、粗壯、分枝多、分枝角度大、無(wú)鎖狀聯(lián)合,明顯見(jiàn)到側(cè)絲,并可見(jiàn)多量橢圓形的膠陀螺分生孢子,無(wú)雜菌污染。
(3)菌種重量標(biāo)準(zhǔn):每袋350~420g(15×30㎝高壓聚丙烯袋)。
(4)內(nèi)觀檢查同原種。
(5)菌種生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)同原種。
3.生產(chǎn)種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程:
(1)生產(chǎn)種必須由原種轉(zhuǎn)接。
(2)生產(chǎn)種所用容器為15×30×0.06㎝高壓聚丙烯袋。
(3)培養(yǎng)料配制:
①配方:柞樹(shù)木屑40%、農(nóng)作物秸桿(黃豆粉或玉米芯)27%、玉米面15%、麥麩15%、石膏1%、白灰0.5%、過(guò)磷酸鈣 1%、硫酸鎂 0.2%、磷酸二氫鉀 0.3%、含水量60~65%、pH值7.0~7.5。
②配制方法:根據(jù)配方要求,先把木屑、玉米芯、石膏等拌勻,然后加水,充分?jǐn)嚢瑁η蟀鑴?,?yán)格掌握好含水量60~65%,堆悶2h,讓水分充分吸收后即可裝袋。裝袋要上下松緊一致,一般裝至袋高10~12㎝左右(干料300~350g),將袋面壓平,用直徑3㎝木棍垂直打一中心洞,以便菌絲生長(zhǎng)到培養(yǎng)料下層也可得到氧氣,認(rèn)真清理袋口黏著物,然后封口,封口用頸圈(直徑2㎝)加棉塞,棉塞上扎牛皮紙或報(bào)紙。
(4)滅菌:常壓蒸汽滅菌100℃維持10~12h,高壓蒸汽滅菌1.5kg/㎝2下2~2.5h,無(wú)論采用何種方法滅菌,必須滅菌徹底。
(5)接種:要確保無(wú)菌操作。
①接種前要凈化和消毒接種室,消毒措施為每立方米空間用3~5g氣霧消毒王熏蒸,并用3%來(lái)蘇兒噴霧,用紫外線燈照射1h。
②接種用工具,包括接種針、鏟要經(jīng)常消毒
③嚴(yán)格挑選原種和處理好原種,接種前要挑選符合優(yōu)質(zhì)菌種標(biāo)準(zhǔn)的適齡的膠陀螺原種,進(jìn)接種室前要用0.1%漂白粉或0.1%高錳酸鉀消毒液清洗,然后移入接種室內(nèi)。每瓶原種擴(kuò)接20~30袋生產(chǎn)種。
④要充分利用酒精燈,接種時(shí)要做到火焰封口,操作時(shí),不能離開(kāi)燈火,細(xì)心快速,不能粗心大意,整個(gè)過(guò)程要做到無(wú)菌操作。
(6)培養(yǎng):接種后培養(yǎng)對(duì)菌種非常重要,要保證平衡發(fā)菌,防止菌種污染、老化和早衰。
①及時(shí)揀出雜菌污染。
②創(chuàng)造一個(gè)良好的發(fā)菌環(huán)境,溫度22℃±2℃、濕度50~60%,經(jīng)常通風(fēng),保持黑暗。
(7)在22℃±2℃條件下,菌絲30~40d可滿袋,5~7d后即可使用。
(8)生產(chǎn)種暫時(shí)貯藏條件:菌種長(zhǎng)滿袋后移到低溫、黑暗、通風(fēng)、干燥處。