【作者】劉柯 李煥軍 張德懷 岳同輝 李娜 徐軍偉

【機(jī)構(gòu)】昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 昆明理工大學(xué)理學(xué)院

摘要：在靈芝(Ganoderma lingzhi)中異源表達(dá)透明顫菌血紅蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因,采用一氧化碳差異波譜分析的方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菌株的生物活性,并對(duì)野生型菌株和工程菌株進(jìn)行發(fā)酵,通過(guò)熒光定量PCR對(duì)靈芝多糖生物合成途徑上的葡萄糖磷酸變位酶(α-phosphoglucomutase,PGM)、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(uridinediphosphate glucose pyrophosphorylase,UGP)和β-1,3-葡聚糖合酶(β-1,3-glucan synthase,GLS)3個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行分析。研究表明:透明顫菌血紅蛋白基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)在靈芝中能夠成功表達(dá),并且具有生物活性;工程菌株中胞外多糖的最高產(chǎn)量達(dá)0.83g/L,比野生型菌株提高了88.6%;與野生型菌株相比,工程菌株中多糖生物合成途徑上PGM、UGP和GLS基因的相對(duì)表達(dá)量分別是1.52、1.55和3.85。異源表達(dá)透明顫菌血紅蛋白基因是提高靈芝胞外多糖產(chǎn)量的一種有效方法。 

基金：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360495和21566016)資助；

關(guān)鍵詞：靈芝; 葡萄糖磷酸變位酶; 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶;