【作者】劉建雨 劉建輝 張丹 徐珍 王瑞娟 楊慧 于海龍 尚曉冬

【機構(gòu)】上海市農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所 農(nóng)業(yè)部應用真菌資源與利用重點開放實驗室,國家食用菌工程技術研究中心 上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室

摘要：將釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根據(jù)金針菇(Flammulina velutipes)的密碼子偏好性進行優(yōu)化,并構(gòu)建FvCas9雙元表達載體,利用農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)化金針菇單核體Dan3,經(jīng)抗性培養(yǎng)基篩選以及潮霉素和Cas9基因PCR擴增驗證,結(jié)果顯示Cas9基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)入金針菇菌絲體中,轉(zhuǎn)化率為6.84%。 

基金：上海市市級農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計劃項目[滬農(nóng)青字(2017)第1-13號]； 上海市市級農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計劃項目[滬農(nóng)青字(2017)第1-11號]； 上海市科技興農(nóng)重點攻關項目[滬農(nóng)科攻字(2015)第5-1號]資助；

關鍵詞：金針菇; 農(nóng)桿菌介導法; CRISPR/Cas9系統(tǒng); Cas9;