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    基于納米金和辣根過氧化物酶雙標記抗體的黃曲霉毒素B1高靈敏檢測方法的建立及應用


    【發(fā)布日期】:2019-01-26  【來源】:菌物學報
    【作者】章先 方云 付子賢 周一釗 方維煥 宋厚輝
    【機構(gòu)】浙江農(nóng)林大學動物科技學院中澳動物健康大數(shù)據(jù)分析聯(lián)合實驗室動物健康檢測互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)浙江省工程實驗室浙江大學動物科學學院浙江省檢驗檢疫科學技術(shù)研究院
    摘要:黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)在自然界普遍存在,可污染多種糧食作物和飼料,給動物和人類健康造成嚴重威脅。為建立AFB1高靈敏度的快速檢測方法,本研究通過采用納米金顆粒(Au nanoparticles,AuNPs)和辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)雙標記AFB1單克隆抗體,建立新型酶聯(lián)免疫檢測方法(HRP-AuNPs IC-ELISA),檢測下限(IC10)為0.017ng/mL,檢測區(qū)間(IC20–IC80)為0.026–0.376ng/mL,半數(shù)抑制率(IC50)為0.099ng/mL,與黃曲霉毒素B2、G1、G2和M1的交叉反應率分別為2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,與赭曲霉毒素A、伏馬毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮幾乎不存在交叉反應。在玉米和面粉樣本中的加標回收率可達88.93–103.55%,與LC-MS/MS同時對天然樣本中AFB1含量進行檢測,結(jié)果表明,兩種方法相關(guān)性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗時短且靈敏度高,可用于實際樣本中AFB1的快速定量檢測與分析,也為其他霉菌毒素的精準檢測技術(shù)開發(fā)提供參考。 
     
    基金:浙江省自然科學基金(LQ17C170002); 浙江農(nóng)林大學人才項目(2016FR025); 浙江省重點研發(fā)計劃(2018C02041); 國家高新技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(2012AA101602)~~;
     
    關(guān)鍵詞:黃曲霉毒素B1; 納米金顆粒; 辣根過氧化物酶; 單克隆抗體;
     
     
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