【作者】劉鑫 侯若琳 金珊珊 戚夢(mèng) 胡開(kāi)輝 鄭明鋒 傅俊生
【機(jī)構(gòu)】福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院福建古田縣食用菌研發(fā)中心福建農(nóng)林大學(xué)(古田)菌業(yè)研究院福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
摘要:從分子水平上探究粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的差異,同時(shí)以人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞篩選粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液抗乳腺癌活性部位,并對(duì)其成分進(jìn)行初步分析?;趓 DNA ITS序列分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)和拆分網(wǎng)絡(luò)(splits network)分析研究粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的差異;采用MTT法檢測(cè)發(fā)酵液不同提取物抗乳腺癌活性;通過(guò)細(xì)胞形態(tài)觀察進(jìn)一步了解活性提取物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;采用LC-MS/MS對(duì)活性提取物的成分進(jìn)行分析。系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)表明粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株存在一定的遺傳差異,粗毛纖孔菌GC含量較桑黃孔菌屬菌株低,同時(shí)拆分網(wǎng)絡(luò)分析法能更好地區(qū)分粗毛纖孔菌與桑黃;粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液正丁醇提取物對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)且呈量效和時(shí)效關(guān)系(P<0.05),作用24h的IC50值為245.44μg/mL;細(xì)胞形態(tài)觀察顯示正丁醇提取物濃度在250μg/mL時(shí),對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡作用隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而加強(qiáng);LC-MS/MS檢測(cè)到正丁醇萃取部分的物質(zhì)有2個(gè),這2個(gè)物質(zhì)均首次在粗毛纖孔菌中鑒定得到。結(jié)果表明,拆分網(wǎng)絡(luò)分析法可較好地用于粗毛纖孔菌與桑黃孔菌屬菌株的分子甄別,正丁醇提取物是粗毛纖孔菌深層發(fā)酵液抗乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的主要活性部位,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用粗毛纖孔菌藥用資源提供科學(xué)依據(jù)。
基金:國(guó)家自然科學(xué)基金(81503187); 福建省中青年教師教育科研項(xiàng)目(JA15177); 福建農(nóng)林大學(xué)現(xiàn)代種業(yè)工程研究院建設(shè)經(jīng)費(fèi); 福建省重大農(nóng)技推廣服務(wù)試點(diǎn)項(xiàng)目(KNJ-153011-4); 福建省食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)重大研發(fā)平臺(tái)(2014N2001)~~;
關(guān)鍵詞:粗毛纖孔菌; 桑黃孔菌屬; 深層發(fā)酵液; 乳腺癌; liquid chromatograph-mass spectrometer(LC-MS/MS);