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    糙皮側(cè)耳乙醛脫氫酶基因PoALDH1的克隆與非生物脅迫下的表達(dá)分析


    【發(fā)布日期】:2019-01-24  【來(lái)源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】戚元成劉元棟孫憲凱張夢(mèng)珂張倩文晴邱立友申進(jìn)文
    【機(jī)構(gòu)】河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
    摘要:本研究從糙皮側(cè)耳中克隆了乙醛脫氫酶基因PoALDH1(Gen Bank登錄號(hào)為KT026035)和其全長(zhǎng)c DNA序列。長(zhǎng)為2 016bp的PoALDH1序列編碼478個(gè)氨基酸,分子量約為52k Da,氨基酸序列中含有乙醛脫氫酶保守的谷氨酸活性位點(diǎn)和半胱氨酸殘基活性位點(diǎn)。PoALDH1基因在大腸桿菌中表達(dá)后顯示,重組菌株的乙醛脫氫酶比活力為0.58U/mg,且重組菌株的乙醛耐受性顯著高于對(duì)照菌株。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR)分析PoALDH1基因在糙皮側(cè)耳不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)結(jié)果顯示,PoALDH1基因在原基期的表達(dá)量約為雙核菌絲期的5倍。PoALDH1基因在原基發(fā)育起始階段經(jīng)光照及溫差刺激后均上調(diào)表達(dá)。當(dāng)糙皮側(cè)耳菌絲暴露在不同濃度的氯化鈉及甘露醇的條件下時(shí),菌絲生長(zhǎng)均受到抑制且PoALDH1基因的表達(dá)量均高于對(duì)照。研究結(jié)果將為進(jìn)一步從分子水平揭示糙皮側(cè)耳的抗逆機(jī)制以及食用菌的發(fā)育奠定一定基礎(chǔ)。 
     
    基金:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-24); 河南省重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(162102110091)~~;
     
    關(guān)鍵詞:糙皮側(cè)耳; 乙醛脫氫酶基因; 非生物脅迫; 原基形成;
     
     
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