【作者】彭軼楠王沛雅鞏曉芳祝英楊暉王治業(yè)周劍平

【機構】甘肅省科學院生物研究所甘肅省微生物資源開發(fā)利用重點實驗室甘肅省科學院自然能源研究所

摘要：寡雄腐霉Pythium oligandrum是一種對動、植物和環(huán)境無害,兼具殺菌和增產效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇與25mmol/L CaCl2和10mmol/L Tris-HCl作為滲透壓穩(wěn)定劑,使寡雄腐霉菌絲體在含有裂解酶、纖維素酶、破壁酶的復合酶系中酶解得到其原生質體。此原生質體通過液體振蕩培養(yǎng)的途徑恢復再生1d后涂于平板上可生長為成熟菌體。本研究所述方法制備得到的寡雄腐霉原生質體數(shù)量超過1×109CFU/m L,活性超過80%;通過液體培養(yǎng)再生途徑使得寡雄腐霉原生質體再生率達32.9%。此方法操作簡便,穩(wěn)定性好,獲得的寡雄腐霉原生質體品質高、數(shù)量多,完全能夠滿足后期基因遺傳轉化、細胞融合培養(yǎng)等研究應用。 

基金：國家國際合作專項項目(2013DFA30950)； 甘肅省基礎研究創(chuàng)新群體計劃(1606RJIA325)； 甘肅省科學院創(chuàng)新團隊(CX201601)； 甘肅省軟科學研究計劃(1205ZCRA170)~~；

關鍵詞：寡雄腐霉; 生防真菌; 原生質體; 制備及再生;