【作者】張琪 程顯好 郭文娟 劉鳳紅 王朝霞
【機(jī)構(gòu)】魯東大學(xué)菌物科學(xué)與技術(shù)研究院天津工業(yè)大學(xué)環(huán)境與化工學(xué)院
【摘要】研究探討鋅離子脅迫下蛹蟲(chóng)草Cordyceps militaris金屬硫蛋白的產(chǎn)生及性質(zhì)。蛹蟲(chóng)草菌絲體以15g/L Zn2+在10L發(fā)酵罐中誘導(dǎo)培養(yǎng)56h后收集,產(chǎn)率為每升發(fā)酵液收集12.021g菌絲體(干重),細(xì)胞破碎取上清液通過(guò)兩次凝膠柱層析,冷凍干燥得到蛹蟲(chóng)草金屬硫蛋白純品。利用Bradford法進(jìn)行蛋白質(zhì)含量測(cè)定,用銀飽和分析法結(jié)合原子吸收光譜(AAS)測(cè)定MT含量,發(fā)酵終點(diǎn)處金屬硫蛋白含量為12.876mg/g菌絲體(濕重)。用電噴霧質(zhì)譜法測(cè)得金屬硫蛋白的分子量為7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分別測(cè)得每分子蛋白質(zhì)含有14個(gè)巰基、結(jié)合5個(gè)Zn原子。氨基酸組成分析結(jié)果顯示,每分子蛋白質(zhì)共含57個(gè)氨基酸,其中含有13個(gè)半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有組氨酸。以上表明,研究中的蛹蟲(chóng)草金屬硫蛋白與哺乳動(dòng)物金屬硫蛋白結(jié)構(gòu)差異較大,但與酵母菌金屬硫蛋白結(jié)構(gòu)組成類似。
【基金】山東省自然科學(xué)基金聯(lián)合專項(xiàng)(No.ZR2010CL005); 煙臺(tái)市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011069);
【關(guān)鍵詞】蛹蟲(chóng)草; 金屬硫蛋白; 鋅誘導(dǎo); 氨基酸組成;