【作者】李興佳 農(nóng)向群 曹廣春 劉迅 王廣君 張澤華

【機(jī)構(gòu)】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 農(nóng)業(yè)部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

【摘要】為了能夠?qū)瘕斪泳G僵菌在花生田間的存活能力進(jìn)行精確的定量研究,通過比對(duì)真菌ITS序列,設(shè)計(jì)出針對(duì)金龜子綠僵菌的特異性引物,并建立金龜子綠僵菌Real-Time PCR反應(yīng)體系。結(jié)果表明,標(biāo)準(zhǔn)品在拷貝數(shù)為8.49×103–8.49×109copies/μL之間,線性關(guān)系良好,線性方程為y=-3.257x+6.969,相關(guān)系數(shù)為R=0.9980,擴(kuò)增效率E=102.8%,檢出痕量為20個(gè)孢子/g土壤。以Real-Time PCR方法和平板稀釋法,分別對(duì)花生根部施用金龜子綠僵菌后不同時(shí)期的土壤進(jìn)行定量分析,結(jié)果表明兩種方法檢測的金龜子綠僵菌數(shù)量變化趨勢相似,施用的金龜子綠僵菌在根圍與根際都呈現(xiàn)先快速下降后緩慢回升的趨勢,90d時(shí)金龜子綠僵菌DNA量和CFU值均下降至初始的10%以下,之后出現(xiàn)回升;根際的金龜子綠僵菌相對(duì)地下降較慢而回升較快,在120d時(shí)可恢復(fù)到初始的52.17%和38.65%,顯著高于根圍的數(shù)量。試驗(yàn)建立的Real-Time PCR體系可用于金龜子綠僵菌土壤宿存的定量檢測,而且適用于低含量的檢測。 

【基金】公益性(農(nóng)業(yè))行業(yè)專項(xiàng)(No.201003025)； 農(nóng)業(yè)部948計(jì)劃(No.2011-G4)； 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)體系(No.CARS-35)；

【關(guān)鍵詞】金龜子綠僵菌; 種群動(dòng)態(tài); 定量分析;