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    土壤中棉花黃萎病菌SYBR Green Ⅰ熒光RT-PCR定量檢測(cè)技術(shù)研究


    【發(fā)布日期】:2019-01-15  【來(lái)源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】肖蕊 余真真 Elsharawy AA 魏鋒 楊家榮
    【機(jī)構(gòu)】西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
    摘要:為實(shí)現(xiàn)田間土壤棉花黃萎病菌的早期檢測(cè),建立了土壤中棉花黃萎病菌的SYBR Green I熒光定量PCR檢測(cè)方法。以含342bp PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的陽(yáng)性質(zhì)粒為參考,構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)該曲線的特異性、敏感性、可重復(fù)性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,該方法具有快速、特異性強(qiáng)、敏感度高等特點(diǎn)。檢測(cè)范圍在3.8×103-3.8×108copies/μL之間有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)R2為0.996,擴(kuò)增效率為101.5%,靈敏度比常規(guī)PCR方法高102倍。
    基金:國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)(3-19); 高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計(jì)劃項(xiàng)目(No.B07049);
    關(guān)鍵詞:大麗輪枝菌; SYBR Green I; 熒光實(shí)時(shí)定量;
     
     
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