【作者】丁一新 趙明文

【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)微生物環(huán)境工程重點開放實驗室南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)微生物環(huán)境工程重點開放實驗室 南京210095

【摘要】根據(jù)已報道的lz8基因序列設(shè)計引物,以靈芝基因組DNA為模板,PCR擴(kuò)增獲得lz8基因。構(gòu)建了原核表達(dá)載體pET30a-lz8,轉(zhuǎn)化原核表達(dá)宿主菌RosettaDE3,IPTG誘導(dǎo)融合蛋白表達(dá),并用Ni-NTA親和層析柱對LZ-8蛋白進(jìn)行分離純化。將純化的LZ-8蛋白用Freund佐劑乳化后注射到新西蘭白兔體內(nèi),經(jīng)數(shù)次加強(qiáng)免疫后采血分離抗血清,并以抗血清為探針建立了LZ-8蛋白的免疫印跡法定性檢測方法。 

【基金】國家自然科學(xué)基金(30300006,30571294)； 江蘇省自然科學(xué)基金創(chuàng)新人才項目(BK2006517)資助；

【關(guān)鍵詞】載體構(gòu)建; 異源表達(dá); Western雜交;