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    產(chǎn)黃青霉工業(yè)生產(chǎn)菌種基因報告系統(tǒng)的構(gòu)建及啟動子效率的評價


    【發(fā)布日期】:2018-03-21  【來源】:菌物學(xué)報
    【作者】任志紅 徐平 王富強 蘇彩云 豐玫玫 張佳 戴夢 韋春玲 穆岷 賀建功
    【機構(gòu)】華北制藥集團新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 華北制藥集團新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 石家莊050015
    【摘要】本研究以四種不同物種來源,不同代謝途徑功能基因的啟動子為材料,分別構(gòu)建了以產(chǎn)黃青霉異青霉素N合成酶(IPNS)基因pcbC的啟動子Pipns、構(gòu)巢曲霉3-磷酸甘油醛脫氫酶基因gpdA的啟動子PgpdA、構(gòu)巢曲霉色氨酸合成基因trpC的啟動子PtrpC、粗糙脈胞霉氨基酸合成交叉途徑控制基因cpc的啟動子Pcpc為啟動子,腐草霉素(phleomycin)抗性基因為報告基因,構(gòu)巢曲霉色氨酸合成基因trpC的終止子TtrpC為終止信號的絲狀真菌轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒,建立了產(chǎn)黃青霉工業(yè)生產(chǎn)菌種啟動子篩選、評價體系,調(diào)查了這四種啟動子的強弱。結(jié)果表明選擇性標(biāo)記基因受強啟動子驅(qū)動可以提高產(chǎn)黃青霉工業(yè)生產(chǎn)菌種的轉(zhuǎn)基因效率。研究也顯示這四種啟動子的強弱的順序為PgpdA、Pcpc、Pipns和PtrpC。 
    【基金】國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(2003AA001005); 國家科技攻關(guān)計劃(2002BA711A16); 國家技術(shù)創(chuàng)新項目計劃資金資助;
    【關(guān)鍵詞】調(diào)控元件; 抗性基因; 轉(zhuǎn)化效率;

    載體結(jié)構(gòu)圖

    產(chǎn)黃青霉菌轉(zhuǎn)化子 PCR 分析 (引物 ph1 和 ph2 擴增結(jié)果)
     
     
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