【作者】郭梅 蒲軍 杜連祥 路福平 白東清

【機構(gòu)】天津科技大學生物工程學院工業(yè)微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業(yè)微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業(yè)微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業(yè)微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業(yè)微生物重點實驗室 天津300222天津農(nóng)學院食品科學系天津300384,天津300222,天津300222,天津300222,天津300222天津農(nóng)學院水產(chǎn)系天津300384

【摘要】以白腐菌雜色云芝Coriolus versicolor RNA為模板,通過RT-PCR獲得漆酶Leel基因的cDNA片段。構(gòu)建了甲醇酵母表達質(zhì)粒pmeta-Lccl載體,并將其線性化后用電穿孔法導入Pichia methabolica PMAD16,部分陽性克隆的PCR結(jié)果表明Lccl基因已經(jīng)整合到甲醇畢赤酵母染色體上,經(jīng)搖瓶培養(yǎng)篩選出表達水平較高的酵母工程菌株。漆酶酶活力達53U/L 

【關(guān)鍵詞】cDNA; 載體的構(gòu)建; 異源表達;

重組質(zhì)粒pmeta一Lccl的酶切鑒定

異源表達;重組酵母基因組DNA