【作者】張永軍方衛(wèi)國金凱羅志兵周永洪肖月華裴炎

【機構(gòu)】農(nóng)業(yè)部生物技術(shù)與作物品質(zhì)改良重點實驗室重慶市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點實驗室西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心農(nóng)業(yè)部生物技術(shù)與作物品質(zhì)改良重點實驗室重慶市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點實驗室西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心 重慶400716

【摘要】根據(jù)幾種絲狀真菌FUS3/KSS1類MAPK的保守序列設(shè)計簡并引物,從昆蟲病原真菌球孢白僵菌中擴增出MAPK基因的部分片段,進而利用YADE法延伸該片段的上、下游鄰接序列,獲得MAPK基因的全長序列,命名為BbMPK1。用3′RACE擴增出BbMPK1的全長cDNA序列,該序列含有一個1071bp的ORF,編碼356個氨基酸的多肽,推測分子量為41.2kDa,等電點為6.61。BbMPK1含有11個MAPK共有的蛋白激酶區(qū)域和1個MAPK激酶作用的磷酸化位點區(qū)域(TEY),其氨基酸序列與絲狀真菌的TMKA、PMK1、CMK1、FMK1和BMP1等MAPK高度同源。系統(tǒng)聚類結(jié)果表明,BbMPK1屬于酵母FUS3/KSS1類MAPK。Southern雜交表明,BbMPK1在球孢白僵菌基因組中以單拷貝形式存在。RT-PCR分析表明BbMPK1在分生孢子休眠階段、萌發(fā)階段和菌絲生長時期均表達。研究結(jié)果為闡明酵母FUS3/KSS1類MAPK同源基因在球孢白僵菌中的作用奠定了基礎(chǔ)。

【基金】國家重點基礎(chǔ)研究計劃(973)項目(2003CB114203)； 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)項目(2002AA214051)； 重慶市教委項目(20204)；

【關(guān)鍵詞】信號傳導(dǎo); 致病性; 昆蟲病原真菌;