【作者】汪天虹 劉倜 劉世利 龍昊 劉謹(jǐn)

【機(jī)構(gòu)】山東大學(xué)微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室山東大學(xué)微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 濟(jì)南250100

【摘要】采將解除了葡萄糖阻遏的纖維素酶高產(chǎn)菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30經(jīng)EMS誘變后,在酪蛋白平板上篩選出部分蛋白酶缺陷突變菌株T.reeseiRutC30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比親本株降低約74%,但生長(zhǎng)特性、產(chǎn)纖維素酶活力等性狀與親本株相同。用攜帶潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(hph)的表達(dá)質(zhì)粒pAN7-1分別轉(zhuǎn)化瑞氏木霉RutC30和RutC30M3原生質(zhì)體,轉(zhuǎn)化結(jié)果顯示RutC30M3(pAN7-1)對(duì)潮霉素的抗性比RutC30(pAN7-1)提高約20%,而Northernblot分析結(jié)果顯示在兩菌株中潮霉素基因轉(zhuǎn)錄水平相似,由此證明宿主菌蛋白酶缺陷對(duì)保護(hù)重組蛋白免于降解有明顯作用。蛋白酶缺陷菌株RutC30M3適于作為瑞氏木霉外源基因表達(dá)系統(tǒng)中的受體菌株用于大量生產(chǎn)同源與異源蛋白。 

【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):30070014)； 山東省自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):Y2000D12)；

【關(guān)鍵詞】瑞氏木霉; EMS誘變; 蛋白酶缺陷株; 外源基因表達(dá)系統(tǒng);