【作者】王景琳；張志東；李忠潤(rùn)；顧良媛；尹世興；

【機(jī)構(gòu)】中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 蘭州 730046；

【摘要】采用蛋白質(zhì)連接技術(shù)合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Balb/c鼠,通過(guò)淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株。間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞上清抗體效價(jià)為1:2084(4H8)、1:256(6H9、4H3、2H5、2C8)、1:16(3F10);腹水抗體效價(jià)為10~9(4H3、4H8)、10~8(2H5)、10~7(6H9)、10~5(3H10)。競(jìng)爭(zhēng)間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定六株單克隆抗體對(duì)玉米赤霉烯酮的敏感度為0.3—0.8ng/ml。六株抗體與玉米亦霉烯醇的交叉反應(yīng)率為1.3—9.0％。六株單克隆抗體均屬I(mǎi)gG類(lèi)。細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)和凍存復(fù)蘇后分泌抗體穩(wěn)定。純化抗體在37℃保存12天穩(wěn)定,-30℃保存90天抗體滴度不變。用該抗體建立競(jìng)爭(zhēng)間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)摻合玉米赤霉烯酮的玉米、小麥、飼料,平均回收率分別為105％、90％、103％,平均批間變異系數(shù)為5.8％、2.8％、6.8％,批內(nèi)變異系數(shù)為3.8％、12.7％、15.7％。樣品中玉米赤霉烯酮摻合量與競(jìng)爭(zhēng)間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢出量有良好相關(guān)性(r≥0.9996)。 

【關(guān)鍵詞】玉米赤霉烯酮；單克隆抗體；免疫分析；

【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金；

【分類(lèi)號(hào)】Q946；