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    抑制消減雜交法分離與鑒定靈芝G蛋白β亞基基因


    【發(fā)布日期】:2012-06-12

    【作者】 徐軍偉; 趙蔚; 鐘建江;

    【機構(gòu)】 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室; 上海交通大學微生物代謝國家重點實驗室;

    【摘要】 靈芝細胞在液體靜置和振蕩培養(yǎng)方式下,抗癌物質(zhì)靈芝酸的產(chǎn)量有顯著的差別。采用抑制消減雜交法分離了靈芝細胞在兩種不同培養(yǎng)方式下差異表達的基因,對構(gòu)建的差減文庫進行篩選后獲得了一個靈芝的EST序列。根據(jù)這個EST序列,采用RACE-PCR的方法成功克隆到了靈芝G蛋白β亞基(Gb)基因(GenBank登錄號GQ293361)。序列分析顯示這個基因cDNA全長1217bp,編碼了313個氨基酸。同源性分析表明其編碼的氨基酸與其他蘑菇類真菌Gβ的氨基酸序列同源性較高,與Coprinopsis cinerea(XP001830441.1)、Lentinula edodes(AAP13580.2)和Schizophyllum commune(XP003029882.1)的一致性分別達到91%、91%和90%。實時熒光定量PCR結(jié)果表明這個基因在液體靜置培養(yǎng)方式下的表達量顯著高于振蕩培養(yǎng)。

    【關(guān)鍵詞】 靈芝G蛋白β亞基; 差異表達;
     
    【基金】 國家自然科學基金“靈芝真菌液體靜態(tài)培養(yǎng)過程中靈芝酸積累的調(diào)控研究”(20776084)

    【分類號】S567.31
     

     
     
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