為進(jìn)一步探討香菇菌多糖的作用機(jī)理,我們進(jìn)行了香菇菌多糖對(duì)免疫功能的影響及抗腫瘤實(shí)驗(yàn),現(xiàn)總結(jié)如下:
一、材料與方法:
1、香菇菌多糖注射液:針劑,每支2ml/4mg,;
2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明種小鼠,蘭州生物制品研究所動(dòng)物室提供,C57/BL小鼠由甘肅省腫瘤研究所動(dòng)物室提供。二組小鼠雌雄兼有,體重為17-22克;
3、瘤株:肝癌(Hep),腦瘤(B22),艾氏腹水癌(EC),肉瘤180(S180)分別由上海藥物所和北京藥物所引來(lái),在甘肅省腫瘤研究所動(dòng)物室傳代半年以上。
4、試劑及其他材料:植物血凝素(PHA),環(huán)磷酰胺,肝素鈉注射液,Hanks溶液,戊二醛混合液,活小牛血清,綿羊紅細(xì)胞懸液,雞紅細(xì)胞懸液,瑞姬染液,甲醇及生理鹽水等。
5、給藥劑量及途徑:小鼠隨機(jī)分組,試驗(yàn)組每日皮下注射香菇菌多糖注射0.2ml/0.4ml,連續(xù)5天停藥1天,于第7天作實(shí)驗(yàn)觀察各項(xiàng)免疫指標(biāo)。同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組,鹽水對(duì)照組,PHA對(duì)照組??鼓[瘤試驗(yàn)給藥劑量為6.6mg/kg,腹腔注射(ip),連續(xù)給藥10天,并設(shè)環(huán)磷酰胺為陽(yáng)性對(duì)照。
6、實(shí)驗(yàn)方法:巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定按參考文獻(xiàn)進(jìn)行;E玫瑰花結(jié)形成實(shí)驗(yàn)按參考文獻(xiàn)進(jìn)行;淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)按體內(nèi)法進(jìn)行。抗腫瘤實(shí)驗(yàn),按1979年全國(guó)抗抗癌協(xié)會(huì)制定“抗腫瘤藥物體內(nèi)篩選規(guī)程”進(jìn)行。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1、香菇菌多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:見(jiàn)表1。從表1結(jié)果可見(jiàn),香菇菌多糖組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)與空白對(duì)照組及生理鹽水對(duì)照組有顯著差異。說(shuō)明香菇菌多糖可以提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。
表1 香菇菌多糖對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
組別 | X±SX(n) | T | P |
空白對(duì)照組 | 21.70±0.497(10) | 14.359 | <0.001 |
生理鹽水對(duì)照組 | 24.20±0.917(10) | 15.614 | <0.001 |
香菇菌多糖組 | 42.75±0.770(10) |
2、香菇菌多糖對(duì)小鼠E玫瑰花結(jié)形成的影響:見(jiàn)表2。從表2說(shuō)明,香菇菌多糖能增強(qiáng)小鼠外周血E玫瑰花結(jié)的形成,與空白對(duì)照及生理鹽水對(duì)照組相比,有顯著差異。
表2 香菇菌多糖對(duì)小鼠E玫瑰花結(jié)形成的影響
組別 | X±SX(n) | T | P |
空白對(duì)照組 | 36.00±0.874(11) | 15.623 | <0.001 |
生理鹽水對(duì)照組 | 24.20±1.129(11) | 22.850 | <0.001 |
香菇菌多糖組 | 42.75±0.684(11) |
3、香菇菌多糖對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響,見(jiàn)表3。香菇菌多糖能促進(jìn)小鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,與空白對(duì)照及生理鹽水對(duì)照組比較有顯著差異。與PHA組比較,無(wú)顯著性意義。說(shuō)明小鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的提高,是香菇菌多糖作用的結(jié)果,并非是PHA刺激作用的結(jié)果。
表3 香菇菌多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
組別 | X±SX(n) | T | P |
空白對(duì)照組 | 19.50±3.36(10) | 7.228 | <0.01 |
PHA對(duì)照組 | 38.90±2.97(10) | 1.607 | <0.05 |
生理鹽水對(duì)照組 | 30.10±1.79(10) | 4.067 | <0.01 |
香菇菌多糖組 | 46.18±3.38(10) |
4、香菇菌多糖對(duì)小鼠移植瘤Hep及B22等瘤株的作用,見(jiàn)表4。表4表明香菇菌多糖對(duì)瘤株B22抑制率為42%,對(duì)Hep的抑制率為11.57-43.16%之間,對(duì)EC的抑制率為14.80%,S180的抑制率為2%,陽(yáng)性對(duì)照組環(huán)磷酰胺對(duì)Hep抑制率是65.07%。香菇菌多糖對(duì)Hep的抑制率與給藥劑量有關(guān),當(dāng)5-6.6mg/kg時(shí)的抑制率在35.78-43.06%之間,劑量增大到10mg/kg對(duì)Hep的抑制率為11.57-11.96%。香菇菌多糖組與陽(yáng)性對(duì)照組環(huán)磷酰胺(CY)組比較,CY的抑制率更顯著,但在實(shí)驗(yàn)終了時(shí),香菇菌多糖組小組體重增加,CY組小鼠體重明顯減輕。說(shuō)明香菇菌多糖除對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用外,還有強(qiáng)壯身體的作用。
表4 香菇菌多糖對(duì)小鼠移植性腫瘤的作用
樣品名稱 | 瘤株 | 劑量 mg/kg |
給途徑及次數(shù) | 動(dòng)物數(shù) | 動(dòng)物體重/克 | 瘤重(克)/生存天數(shù)(天) | 抑瘤率 (%) |
P | 備注 | |||
開(kāi)始 | 結(jié)束 | 開(kāi)始 | 結(jié)束 | |||||||||
給藥/ 對(duì)照 |
給藥/ 對(duì)照 |
給藥/ 對(duì)照 |
給藥/ 對(duì)照 |
治療 | 對(duì)照 | |||||||
香 菇 菌 多 糖 |
B22 | 6.6 | ipX10 | 10/10 | 9/8 | 20.5/20.4 | 25.5/26.0 | 0.478±0.557 | 0.6275±0.638 | 42.24 | <0.05 | 提前給藥5天 |
Hep | 6.6 | ipX10 | 10/10 | 8/9 | 20.4/20.4 | 18.0/26.4 | 0.75±0.27 | 1.24±0.41 | 38.42 | |||
Hep | 6.6 | ipX10 | 10/12 | 9/12 | 21.1/25.0 | 23.8/21.9 | 0.65±0.25 | 1.07±0.57 | 39.42 | <0.05 | ||
Hep | 10 | ipX10 | 10/15 | 10/13 | 21.4/32.4 | 21.4/23.4 | 0.97±0.21 | 1.10±0.32 | 11.96 | |||
Hep | 6.6 | ipX10 | 10/12 | 10/11 | 22.2/26.3 | 20.8/26.8 | 1.03±0.57 | 2.03±1.11 | 35.78 | 停藥一周處理 | ||
Hep | 5.0 | ipX10 | 10/13 | 9/12 | 23.6/36.6 | 25.6/23.5 | 0.79±0.28 | 1.39±0.59 | 43.06 | <0.02 | 提前5天給藥 | |
Hep | 10 | ipX10 | 10/10 | 8/9 | 23.1/22.7 | 33.5/28.5 | 0.70±0.26 | 0.79±0.25 | 11.57 | |||
Hep | 6.6 | ipX10 | 10/10 | 8/9 | 23.1/22.7 | 33.5/28.5 | 0.85±0.27 | 1.40±0.58 | 39.42 | 停藥5天處理 | ||
EC | 5.0 | ipX10 | 10/13 | 8/10 | 21.6/27.4 | 25.0/26.8 | 0.98±0.53 | 1.16±0.52 | 14.87 | |||
S180 | 10 | ipX10 | 10/12 | 9/11 | 21.8/26.2 | 27.0/26.1 | 2.3±1.003 | 2.35±0.95 | 2.0 | |||
CY | Hep | 30 | ipX10 | 9/10 | 8/8 | 19.0/19.2 | 17.2/21.0 | 0.388 | 1.112 | 65.07 | <0.001 |
三、討論
經(jīng)小鼠免疫功能實(shí)驗(yàn),香菇菌多糖有顯著提高巨噬細(xì)胞吞噬作用,有顯著提高小鼠外周血E玫瑰花形成和體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,表明香菇菌多糖有提高機(jī)體免疫力的作用。