具體步驟
1.計(jì)算。按照選定的培養(yǎng)基配方，計(jì)算各種成分的用量。
2.稱量。用天平秤取各種物質(zhì)，馬鈴薯去皮去芽眼，削掉青綠部分，對(duì)不易稱量的成分，可用玻棒和燒杯稱重，微量元素等需要量少，難以稱準(zhǔn)時(shí)，可先配成較濃的原液，再?gòu)闹腥〕鲂枰牧俊?/div>
3.配制。若配制合成培養(yǎng)基，先量取蒸餾水，加入瓊脂，加熱溶化；再加入稱好的其他物質(zhì)。為避免發(fā)生沉淀造成營(yíng)養(yǎng)損失，加入的順序一般是先加緩沖劑，再依次加入主要元素、微量元素和維生素等；若各種成分均不發(fā)生沉淀，也可一起加入。
4.煮汁，去濾液。馬鈴薯切成1㎝見(jiàn)方的小塊或2~3㎜厚的薄片，加水約1200ml煮沸，再用文火保持20~30分鐘、并適當(dāng)攪拌，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)充分溶解出來(lái)，然后用4層預(yù)濕的紗布過(guò)濾，取其濾液。
5.補(bǔ)足水量，加藥品溶化。補(bǔ)足水量至1000ml，然后往濾液中加入瓊脂，小火加熱，攪拌至瓊脂完全溶解，再加入葡萄糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)使其溶化后，用PH試紙檢測(cè)其PH值，可根據(jù)需要使用氫氧化鈉和鹽酸，調(diào)整適宜的酸堿度，進(jìn)行分裝。注意開(kāi)鍋攪拌，防止溢出或焦底。
6.分裝試管。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)趁熱分裝，可用玻璃試管，首先把較大的玻璃漏斗固定在滴定架上，下接一段乳膠管和玻璃管，用彈簧夾夾住膠管。手拿試管，分裝量掌握在試管長(zhǎng)度的四分之一。注意分裝時(shí)，培養(yǎng)基不能粘在試管口壁上，否則會(huì)污染棉塞。
7.賽棉塞，注意要松緊適度。
8.高壓鍋滅菌30分鐘。
